[[鄂藥管械（準(zhǔn)）字2004第2400710號(hào)]

【原理】

尿碘檢測(cè)采用碘催化砷鈰反應(yīng)的原理,使用指示劑指示反應(yīng)終點(diǎn),根據(jù)尿碘含量與反應(yīng)時(shí)間成冪函數(shù)的定量關(guān)系計(jì)算尿碘濃度。

【技術(shù)性能指標(biāo)】

1 試劑盒的的檢出下限為6μg／L;

2 相對(duì)誤差小于10%;

3 批間變異系數(shù)小于5%。

【試劑盒組成及效期】

1 消解液，用于消解尿樣；

2 還原劑，參與催化反應(yīng)；

3 指示劑，指示催化反應(yīng)終點(diǎn)；

4 氧化劑，參與催化反應(yīng)；

5 系列碘標(biāo)準(zhǔn)液5瓶，50－400 μg／L。碘標(biāo)準(zhǔn)液含特定基質(zhì)。尿樣參考物質(zhì)（供選擇）。

6 2-8℃下貯存，有效期為6個(gè)月。

【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】

1 在2－8℃下貯存的試劑盒使用前需在室溫下平衡30分鐘，消解液稀釋后直接使用。

2 用戶(hù)自備器材：①15×（120－150）mm試管若干；②秒表一塊，精度0.01秒；③加樣器200μl、500μl，1000μl各一支；④電熱干燥箱（或恒溫消解儀）。

3 消解液為固體包裝，使用前用水溶解，充分混勻。不同規(guī)格的試劑盒加水量如下表：

【操作步驟】（標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備與樣品的測(cè)定）

1 使用加樣器準(zhǔn)確移取50，100，200，300，和400μg/L的系列碘標(biāo)準(zhǔn)溶液和尿樣各0.2ml于試管中，各加1.0ml消解液，在干燥箱（或恒溫消解儀）中于105℃（消解溫度改為105℃，提請(qǐng)用戶(hù)注意）下加熱1小時(shí)消解。取出試管，冷至室溫，每管加入1.0ml還原劑，搖勻。每管加入0.5ml指示劑，搖勻。注意：指示劑在溶液中時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易鈍化，一次加入的管數(shù)不要過(guò)多，以20管為宜。

2 準(zhǔn)備好秒表、記錄本和一張白紙，以下單管操作。選定一管，一手用加樣器快速加入0.5ml氧化劑，另一手同時(shí)啟動(dòng)秒表計(jì)時(shí)，立即放下加樣器，取出該試管搖勻，此時(shí)試液變?yōu)樗{(lán)色。以白紙為背景，觀察試管內(nèi)顏色的變化。隨著反應(yīng)的進(jìn)行，試液將從藍(lán)色變?yōu)樗{(lán)紫色zui后變?yōu)榧t色。藍(lán)色是反應(yīng)進(jìn)行色，時(shí)間較長(zhǎng)。藍(lán)紫色是反應(yīng)接近終點(diǎn)色，持續(xù)時(shí)間較短。紅色是反應(yīng)完成色，穩(wěn)定。當(dāng)試液變?yōu)樗{(lán)紫色且剛出現(xiàn)紅色時(shí)（突變點(diǎn)）停止秒表，記錄反應(yīng)時(shí)間（秒）。突變點(diǎn)的確定根據(jù)操作者的觀察習(xí)慣，只要一致即可。重復(fù)上面操作，測(cè)定其余樣品管。操作步驟如下表所示。

操作步驟簡(jiǎn)略表

【尿碘含量的計(jì)算】

反應(yīng)時(shí)間S（秒）的對(duì)數(shù)值lnS或lgS與碘濃度 C（μg/L）的對(duì)數(shù)值lnC（或lgC）成線性關(guān)系：lnC=a+blnS （或lgC=a+blgS）。使用計(jì)算機(jī)的客戶(hù)可按本公司免費(fèi)提供的計(jì)算程序計(jì)算，推薦使用。計(jì)算程序從本公司網(wǎng)站下載，http://www.whzssh.com。若使用函數(shù)計(jì)算器，按下述方法計(jì)算。舉例如下：

17℃下測(cè)得一組數(shù)據(jù)如下：

以CASIO（卡西歐）3600型計(jì)算器為例，操作如下：

開(kāi)啟回歸模式：MODE 2，INV AC，求標(biāo)準(zhǔn)曲線反應(yīng)時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的回歸方程。

輸入數(shù)據(jù)：78.03ln（log） xD,yD50ln（log）DATA；

┇

20.93ln（log） xD,yD400ln（log）DATA。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)r值：INV 9；（－0.9995） 　 b值：INV 8；（－1.571）　　a值：INV 7（10.759）。

樣品濃度的計(jì)算，樣1：45.96ln（log） y xINVln（log），得出 115.1μg/L。

同理得出樣2的測(cè)定結(jié)果為200.1μg/L。

注意：INV鍵在有些計(jì)算器上標(biāo)為SHIFT，二者功能相同。

【尿樣的收集及保存】

1 尿樣以晨尿?yàn)閮?yōu);隨意一次尿樣也可（使用隨意尿樣如檢測(cè)為缺碘需復(fù)查確正）；

2取排尿過(guò)程中的中段尿樣至少10ml,取其2ml分裝在血清離心管中便于保存,用于測(cè)定。

3 被測(cè)者在留取尿樣的前一天不得食用海帶紫菜等高碘食品和含碘藥品，也不得為排尿而故意飲水。

4 尿樣常溫保存為7天，2-8℃下為1個(gè)月，不提倡冷凍保存。

【檢測(cè)注意事項(xiàng)】

1 尿碘測(cè)定屬超微量分析，測(cè)定場(chǎng)所不得放置高碘物品如碘酒、碘鹽等；測(cè)定所用器材應(yīng)清洗干凈。

2 溫度影響反應(yīng)速度。在加入氧化劑后的計(jì)時(shí)測(cè)定過(guò)程中，需在恒溫條件下進(jìn)行，避免空氣流動(dòng)過(guò)大和陽(yáng)光直射。如室溫不恒定，可將試管置于室溫水浴中測(cè)定，以減少溫度對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。適宜測(cè)定的室溫范圍為15－25℃。當(dāng)氣溫大于25℃時(shí)，反應(yīng)速度可能過(guò)快，可將指示劑用去離子水適當(dāng)稀釋?zhuān)♂尡壤秊椋核褐甘緞?：5，體積比，以降低反應(yīng)速度，便于操作。

3 曲線回歸方程的相關(guān)系數(shù)的值達(dá)0.995以上時(shí)，才能保證測(cè)定的準(zhǔn)確度。

4 因0的對(duì)數(shù)無(wú)意義，故標(biāo)準(zhǔn)曲線不設(shè)0管。本方法的檢測(cè)靈敏度為6μg/L ，小于50μg/L的尿碘濃度可通過(guò)曲線外推求得。

5 反應(yīng)終點(diǎn)的觀察是本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵，只能一人操作。

6 電熱干燥器（烤箱）在使用之前應(yīng)擦洗干凈，防止鐵銹和灰塵污染樣品。加熱時(shí)注意不要堵塞恒溫干燥箱頂部的通風(fēng)口，保持與外界壓力的一致。

7 試劑啟封后應(yīng)將封口鋁箔撕扯干凈，防止鋁箔外層鋁與試劑反應(yīng)，造成試劑失效。

8 使用全塑加樣器加取試劑和樣品。不得使用金屬桿加樣器，不提倡使用玻璃吸管。

9加樣器吸頭出現(xiàn)掛水珠現(xiàn)象應(yīng)及時(shí)更換。

10 試劑中還原劑有一定毒性，不慎濺入口鼻時(shí)請(qǐng)盡快用水沖洗。

【尿碘水平參考值】

以尿碘水平為指標(biāo)，我國(guó)現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)是：人體zui適宜的碘含量水平是100-400μg/L。人體對(duì)碘的安全耐受量是1000μg/L。不同人群缺碘的判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：

【包裝單位】

120管（60ml×6瓶）約測(cè)定100人份；

70管（70ml×2瓶，35ml×2瓶）約測(cè)定50人份；